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武漢貝科新肽科技有限公司
主營：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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原位雜交的基本原理是利用標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞或組織中的DNA或RNA進(jìn)行雜交，然后通過檢測標(biāo)記來識別探針的位置。這使得研究人員能夠在細(xì)胞或組織中確定特定基因或基因組區(qū)域的位置和表達(dá)水平。
原位雜交可以用于多種類型的實(shí)驗(yàn)。例如，它可以用來檢測特定基因在發(fā)育過程中的表達(dá)模式，或者確定特定基因變異在細(xì)胞中的分布。此外，原位雜交還可以用于診斷疾病，例如某些類型的，以及監(jiān)測效果。
菌落的裂解及DNA結(jié)合于纖維素濾膜
（1） 在一張保鮮膜上制作一個裝有0.5mol/L NaOH的小洼（0.75ml），使菌落面朝上，染色體原位雜交，將濾膜放到小洼上，展平保鮮膜，原位雜交，使濾膜均勻濕潤，讓濾膜留于原處2-3分鐘。
（2） 用干紙巾從濾膜的下方吸干濾膜，用一張新的保鮮膜和新配制的0.5mol/L NaOH重復(fù)步驟（1）。
（3） 吸干濾膜，將濾膜轉(zhuǎn)移到新的帶有1mol/L Tris·Cl(pH7.4）的保鮮膜洼上。5分鐘后吸干濾膜，再重復(fù)一次該步驟。
（4） 吸干濾膜，把它轉(zhuǎn)移到有1.5mol/L NaCl、0.5mol/L Tris·Cl (pH7.4）的保鮮膜小洼上5分鐘后吸干濾膜，轉(zhuǎn)移到一張干的濾紙上，置于室溫20-30分鐘，使濾膜干燥。
（5） 將濾膜夾在兩張干的濾紙之間，在真空烤箱中于80℃干烤2小時，固定DNA。
（6） 將固定在膜上的DNA與32 P標(biāo)記的RNA進(jìn)行雜交。
熒光原位雜交（FISH）技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn)：
高特異性：熒光探針的合成是定向的，染色體熒光原位雜交，保證了雜交過程的特異性，可以有效地降低非特異性雜交和背景干擾。
高靈敏度：熒光信號的檢測比性信號的檢測更靈敏，植物原位雜交，可以檢測出低拷貝數(shù)的DNA序列，甚至可以檢測單個基因序列。
快速簡便：FISH技術(shù)操作簡便，雜交過程可以在數(shù)小時或數(shù)天內(nèi)完成，而且不需要過于復(fù)雜的設(shè)備，便于在實(shí)驗(yàn)室開展。
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