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武漢貝科新肽科技有限公司
主營(yíng)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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| 先生： |
在原位雜交過(guò)程中，需要使用標(biāo)記的核酸探針，染色體熒光原位雜交，通常是在性核素或非性物質(zhì)中標(biāo)記的。這些探針可以通過(guò)不同的方式制備，例如從已知序列的DNA或RNA制備，或者通過(guò)使用生物信息學(xué)方法設(shè)計(jì)和合成新的探針。
在進(jìn)行原位雜交時(shí)，細(xì)胞或組織需要固定在適當(dāng)?shù)闹С治锷?，例如載玻片。然后，探針與細(xì)胞或組織中的DNA或RNA進(jìn)行雜交，通常是在加熱條件下進(jìn)行的。接下來(lái)，通過(guò)洗滌和顯影步驟去除未結(jié)合的探針和信號(hào)增強(qiáng)劑，后用顯微鏡觀察雜交信號(hào)的位置。
原位雜交第二天
1.
1）將探針回收，放于－20C保存(通常探針可重復(fù)使用十次左右)。
2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分鐘，重復(fù)一次。
3）置換2XSSCT1ml，60℃，放置15分鐘。
4）置換0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分鐘，重復(fù)一次。
2.
1）用MABT洗兩次，每次五分鐘，放在搖床輕輕搖動(dòng)。
2）室溫下加1ml 1：2：7溶液，時(shí)間為一小時(shí)。
3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶連，4C 冰箱過(guò)夜。
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第3年
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