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武漢貝科新肽科技有限公司
主營(yíng)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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原位雜交技術(shù)可以應(yīng)用于以下場(chǎng)景：
組織中病毒DNA/RNA的檢測(cè)和定位。例如，可以用于檢測(cè)EB病毒mRNA、人類狀瘤病毒和巨細(xì)胞病毒DNA等。
癌基因、抑癌基因及其他各種功能基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)及其變化的檢測(cè)。
檢測(cè)染色體的變化，如染色體數(shù)量異常和染色體易位等。
在植物基因組研究中的應(yīng)用。例如，熒光原位雜交，通過與特定基因序列的探針進(jìn)行雜交，可以在植物染色體上定位到目標(biāo)基因的位置，進(jìn)而構(gòu)建遺傳圖譜，為植物育種和基因組研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
將32 P標(biāo)記的雙鏈DNA探針于100℃加熱5分鐘，迅速置于冰浴中。單鏈探針不必變性。將探針加到雜交袋中雜交過夜。雜交期間，盛濾膜的容器應(yīng)蓋嚴(yán)，以防液體蒸發(fā)。
雜交結(jié)束后，去除雜交液，立即于室溫把濾膜放入大體積（300-500ml）的2×SSC和0.1% SDS溶液中，輕輕振搖5分鐘，并將濾膜至少翻轉(zhuǎn)一次。重復(fù)洗 一次，同時(shí)應(yīng)避免膜干涸。
68℃用300-500ml 1×SSC和0.1% SDS溶液洗膜兩次，每次1-1.5小時(shí)。此時(shí)已可進(jìn)行自顯影。如背景很高或?qū)嶒?yàn)要求嚴(yán)格的洗膜條件，可用300-500ml 0.2×SSC和0.1% SDS的溶液于68℃將濾膜浸泡60分鐘。
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第3年
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