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武漢科銳諾生物科技有限公司
主營：外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術服務
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| 先生： |
原位雜交第三天
1） 用1ml含10%熱滅清的MABT溶液置換溶液，放置搖床上25分鐘，然后用1mlMABT置換，25分鐘，再用1mlMABT溶液置換，一小時以上，后用1mlMABT溶液置換，25分鐘。
2） 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置五分鐘。
3）將胚胎轉入十六孔板中，吸去staining buffer，加上300ul BM Purple AP Substrate（底物，用之前加5mM左旋米唑），十六孔板外面包上錫箔紙以避光，避免搖動，室溫下顯色。
4）每隔一小時觀察胚胎是否開始顯色
5）將顯色完全的胚胎中的底物吸出，用PBST洗兩三次后加上4%多聚甲醛固定，拍照。
6）4C冰箱保存。
原位末端凋亡檢測（Tunel）
實驗原理： TUNEL技術可對組織或細胞中凋亡小體或單個凋亡細胞進行染色，能準確反映細胞凋亡典型的生物化學和形態(tài)特征。凋亡細胞內內源性核酸內切酶被而將自身染色體DNA切斷成缺口或3-OH末端片段這一特點，利用脫氧核苷酸末端轉移酶將標有標記物(如，生物素或熒光素)的脫氧核苷酸轉移到3-OH末端，再用組化法或熒光檢測凋亡細胞。
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第4年
