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武漢科銳諾生物科技有限公司
主營：外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術(shù)服務(wù)
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癌組織原位雜交實(shí)驗(yàn)步驟：
1. 將準(zhǔn)備做原位雜交的樣本常規(guī)脫水、浸蠟、包埋。切片厚度6-8μm。
2. 玻片的處理：一般采用多聚賴氨酸或APES。
3. 石蠟切片經(jīng)常規(guī)脫蠟至水。30%H2O2 1份+蒸餾水10份混合，室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。
4. 暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%檸檬酸新鮮稀釋的胃蛋白酶（1ml 3% 檸檬酸加2滴濃縮型胃蛋白酶，混勻），37℃或室溫消化3--30分鐘（視標(biāo)本新舊、厚薄自行調(diào)整）。原位雜交用PBS洗3次×5分鐘。蒸餾水洗1次。
通過分子檢測協(xié)助病理診斷
某些腫1瘤具有特定的分子病理學(xué)改變，對于病理常規(guī)染色難于診斷的這些腫1瘤，進(jìn)行分子病理檢測可協(xié)助得出準(zhǔn)確的病理診斷。例如淋巴1瘤的鑒別診斷往往依賴于形態(tài)和免1疫組化的綜合判斷，但有些時候，這些手段也不能滿足診斷的需要，這時我們通過IG或TCR基因重排檢測，可協(xié)助鑒別淋巴細(xì)胞的普通增殖和腫1瘤性增殖。
在酵母雙雜交系統(tǒng)中，BD與X蛋白融合，AD與Y蛋白融合，如果X、Y之間形成蛋白-蛋白復(fù)合物，AD與BD會在空間上充分接近，重新構(gòu)成結(jié)構(gòu)域，啟動報告基因的轉(zhuǎn)錄。擁有BD質(zhì)粒的酵母可以在某一缺陷培養(yǎng)基上生長，植物組織原位雜交技術(shù)服務(wù)，擁有AD質(zhì)粒的酵母菌可以在另一種缺陷培養(yǎng)基上生長，通過接合（mating）或共轉(zhuǎn)化使酵母同時擁有AD與BD質(zhì)粒。如果BD上的目的蛋白與AD上的誘餌蛋白存在相互作用，這樣的酵母可以在三缺及四缺的培養(yǎng)基上生長，并啟動β-半乳糖苷酶基因的轉(zhuǎn)錄。
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第4年
