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武漢貝科新肽科技有限公司
主營：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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| 先生： |
同一樣本可以多次做原位雜交實驗嗎?
一般情況下，如果操作沒有得到理想的結(jié)果，是可以將探針洗滌然后進(jìn)行再次的雜交的。如果使用的是直標(biāo)型探針，還可以使用不同探針對同一樣本進(jìn)行反復(fù)雜交。針對不同的樣本，處理方法略有不同。
原位雜交實操中哪些因素比較重要?
重要的因素：溫度、光照、濕度和試劑的PH值。溫度和濕度直接影響著探針和目標(biāo)DNA的雜交效率；光照影響著熒光染料的強(qiáng)度，所以探針要避光保存，其已經(jīng)雜交的片子可用防熒光淬火劑封片且避光保存；各種試劑pH也要達(dá)到要求，熒光原位雜交，這也直接關(guān)系到原位雜交的穩(wěn)定性。
原位雜交技術(shù)的原理是什么？有何用途
原位雜交技術(shù)的原理是利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基序列，將有性或非性的外源核酸(即探針)與組織、細(xì)胞或染色體上待測DNA或RNA互補(bǔ)配對，結(jié)合成專一的核酸雜交分子，經(jīng)一定的檢測手段將待測核酸在組織、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列要具備3個重要條件：組織、細(xì)胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補(bǔ)的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標(biāo)記物(曾呈奎等2000)。
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