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武漢科銳諾生物科技有限公司
主營(yíng)：外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術(shù)服務(wù)
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| 先生： |
1、組織取材：組織取材應(yīng)盡可能新鮮。由于組織RNA降解較快，所以新鮮組織和培養(yǎng)細(xì)胞在30 min 內(nèi)固定。
2、細(xì)胞組織固定目的與注意事項(xiàng)：
（1）保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)；
（2）大限度地保持細(xì)胞內(nèi)DNA或RNA的水平；
（3）使探針易于進(jìn)入細(xì)胞或組織。
常用的固定劑是多聚甲醛，水稻RNA原位雜交測(cè)試服務(wù)，與其它醛類固定劑不同，多聚甲醛不會(huì)與蛋白質(zhì)產(chǎn)生廣泛的交叉連接，因而不會(huì)影響探針穿透入細(xì)胞或組織。
在酵母雙雜交系統(tǒng)中，BD與X蛋白融合，AD與Y蛋白融合，如果X、Y之間形成蛋白-蛋白復(fù)合物，AD與BD會(huì)在空間上充分接近，重新構(gòu)成結(jié)構(gòu)域，啟動(dòng)報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄。擁有BD質(zhì)粒的酵母可以在某一缺陷培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，擁有AD質(zhì)粒的酵母菌可以在另一種缺陷培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，通過接合（mating）或共轉(zhuǎn)化使酵母同時(shí)擁有AD與BD質(zhì)粒。如果BD上的目的蛋白與AD上的誘餌蛋白存在相互作用，這樣的酵母可以在三缺及四缺的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，并啟動(dòng)β-半乳糖苷酶基因的轉(zhuǎn)錄。
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第3年
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