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武漢科銳諾生物科技有限公司
主營(yíng)：外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術(shù)服務(wù)
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菌落的裂解及DNA結(jié)合于纖維素濾膜
（1） 在一張保鮮膜上制作一個(gè)裝有0.5mol/L NaOH的小洼（0.75ml），使菌落面朝上，將濾膜放到小洼上，展平保鮮膜，使濾膜均勻濕潤(rùn)，讓濾膜留于原處2-3分鐘。
（2） 用干紙巾從濾膜的下方吸干濾膜，用一張新的保鮮膜和新配制的0.5mol/L NaOH重復(fù)步驟（1）。
（3） 吸干濾膜，將濾膜轉(zhuǎn)移到新的帶有1mol/L Tris·Cl(pH7.4）的保鮮膜洼上。5分鐘后吸干濾膜，再重復(fù)一次該步驟。
（4） 吸干濾膜，把它轉(zhuǎn)移到有1.5mol/L NaCl、0.5mol/L Tris·Cl (pH7.4）的保鮮膜小洼上5分鐘后吸干濾膜，轉(zhuǎn)移到一張干的濾紙上，置于室溫20-30分鐘，使濾膜干燥。
（5） 將濾膜夾在兩張干的濾紙之間，在真空烤箱中于80℃干烤2小時(shí)，固定DNA。
（6） 將固定在膜上的DNA與32 P標(biāo)記的RNA進(jìn)行雜交。
原位雜交雜交液注意事項(xiàng)：
（1）雜交液內(nèi)除含一定濃度的標(biāo)記探針外，還含有較高濃度的鹽類(lèi)、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛血1清白蛋白及載體DNA或RNA等。
（2）雜交液中含有較高濃度的Na+可使雜交率增加，可以減低探針與組織標(biāo)本之間的靜電結(jié)合。甲酰胺可使Tm降低，雜交液中含每1%的甲酰胺可分別使RNA：RNA，RNA：DNA，DNA：DNA的雜交溫度降低0.35℃，0.5℃和0.65℃。，所以雜交液中加入適量的甲酰胺，可避免因雜交溫度過(guò)高而引起的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的破壞以及標(biāo)本的脫落。硫酸葡聚糖能與水結(jié)合，從而減少雜交液的有效容積，提高探針有效濃度，以達(dá)到提高雜交率的目的（尤其對(duì)雙鏈核酸探針）。
在雜交液中加入牛血1清白蛋白及載體DNA或RNA等，都是為了阻斷探針與組織結(jié)構(gòu)成分之間的非特異性結(jié)合，以減低背景。
原位雜交是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交，從而對(duì)特定核酸順序進(jìn)行精1確定量定位的過(guò)程。原位雜交可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行。
原位雜交的特點(diǎn)是雜交在顯微鏡載玻片上中期染色體標(biāo)本上進(jìn)行。所謂原位即指標(biāo)本上DNA原位變性，在利用放1射性或非放1射性標(biāo)記的已知核酸探針雜交后，植物基因組原位雜交檢測(cè)技術(shù)服務(wù)，通過(guò)放1射自顯影或非放1射性檢測(cè)體系來(lái)檢測(cè)染色體上特異DNA或RNA順序，可用放1射性顆粒在某條染色體的區(qū)帶出現(xiàn)的頻率或熒光的強(qiáng)弱來(lái)確定探針的位置，從而進(jìn)行準(zhǔn)確的基因定位。
科銳諾(多圖)-植物基因組原位雜交檢測(cè)技術(shù)服務(wù)由武漢科銳諾生物科技有限公司提供。武漢科銳諾生物科技有限公司堅(jiān)持“以人為本”的企業(yè)理念，擁有一支高素質(zhì)的員工隊(duì)伍，力求提供更好的產(chǎn)品和服務(wù)回饋社會(huì)，并歡迎廣大新老客戶(hù)光臨惠顧，真誠(chéng)合作、共創(chuàng)美好未來(lái)。科銳諾——您可信賴(lài)的朋友，公司地址：湖北省武漢市江夏區(qū)神墩四路666號(hào)武漢國(guó)英種子A棟1樓，聯(lián)系人：王經(jīng)理。溫馨提示：以上是關(guān)于科銳諾(多圖)-植物基因組原位雜交檢測(cè)技術(shù)服務(wù)的詳細(xì)介紹，產(chǎn)品由武漢科銳諾生物科技有限公司為您提供，如果您對(duì)武漢科銳諾生物科技有限公司產(chǎn)品信息感興趣可以聯(lián)系供應(yīng)商或者讓供應(yīng)商主動(dòng)聯(lián)系您 ，您也可以查看更多與技術(shù)合作相關(guān)的產(chǎn)品！
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